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Del Ry S.; Cabiati M.; Colotti C.; Lionetti V.; Maltinti M.; Giannessi D. (2007)
mRNA expression in myocardial tissue of CNP, BNP and its main receptors NPR-B and NPR-A: a methodological assessment
"^^rdf:HTML ; pubblicazioni:autori "Del Ry S.; Cabiati M.; Colotti C.; Lionetti V.; Maltinti M.; Giannessi D."^^xsd:string ; pubblicazioni:convegno "Clinical Chemistry and Laboratory Medicine"^^xsd:string . @prefix ns12: . prodotto:ID109117 pubblicazioni:rivista ns12:ID176621 ; pubblicazioni:note "In: Clinical Chemistry and Laboratory Medicine, vol. 45 pp. w132 -. S1-S473 EUROMEDLAB Amsterdam 2007. Walter de Gruyter, 2007."^^xsd:string ; pubblicazioni:descrizioneSinteticaDelProdotto "Background: Recently C-type natriuretic peptide (CNP) was supposed to be produced directly in the myocardium. Aim: to investigate the expression of mRNA coding for CNP and its main receptor (NPR-B) in myocardial tissue by use of RT-PCR. Since cardiac tissue is the main site of synthesis for BNP we also analysed BNP and NPR-A expression. Methods: Total RNA was isolated from the cardiac tissue samples (BALB/c mice, n=5) by guanidinium thyocyanate-phenol-chloroform method. To check the sensitivity and linearity of the amplification, RT-PCR for each primer was performed in a range of different number of cycles, annealing temperatures and RNA concentrations. GAPDH mRNA expression was determinated as internal control. Results: The optimal reaction conditions chosen were: 0.2 microg of RNA; annealing time and temperature of 60 s at 59\u00B0, 61\u00B0, 69\u00B0, 63\u00B0, 57\u00B0C for GAPDH, BNP, CNP, NPR-B, NPR-A primers, respectively; 30 cycles for BNP, NPR-A and GAPDH, 40 for CNP and 35 for NPR-B; extension time of 72\u00B0C. Bands were analyzed by Quanty One Software. The proposed method allowed us to detect the expression of mRNA coding for CNP and NPR-B in myocardial tissue confirming the presence of this effector in the heart. These preliminary data appear to indicate that CNP mRNA expression is lower with respect to that of BNP (CNP/GAPDH=0.117 vs. BNP/GAPDH=0.247) and that NPR-B is predominant in heart (NPR-A/GAPDH=0.244\u00B10.028; NPR-B/GAPDH=0.657\u00B10.022; p=0.0008). Conclusions: the determination of cardiac mRNA expression of CNP and NPR-B could constitute an useful tool to better study the role of this natriuretic peptide in experimental animal models of cronic heart failure."^^xsd:string ; pubblicazioni:affiliazioni "Istituto di Fisiologia Clinica - CNR; Scuola Superiore Sant'Anna, Pisa"^^xsd:string ; pubblicazioni:titolo "mRNA expression in myocardial tissue of CNP, BNP and its main receptors NPR-B and NPR-A: a methodological assessment"^^xsd:string ; prodottidellaricerca:prodottoDi modulo:ID7085 , istituto:CDS035 ; pubblicazioni:autoreCNR unitaDiPersonaleEsterno:ID21406 , unitaDiPersonaleInterno:MATRICOLA9684 , unitaDiPersonaleInterno:MATRICOLA8489 , unitaDiPersonaleInterno:MATRICOLA7374 . @prefix parolechiave: . prodotto:ID109117 parolechiave:insiemeDiParoleChiave . ns12:ID176621 pubblicazioni:rivistaDi prodotto:ID109117 . parolechiave:insiemeDiParoleChiaveDi prodotto:ID109117 .