@prefix descrizioni: . @prefix commessa: . @prefix commessa-descrizione: . commessa:ID1198 descrizioni:descrizione commessa-descrizione:ID1198 . @prefix rdf: . @prefix descrizionecommessa: . commessa-descrizione:ID1198 rdf:type descrizionecommessa:DescrizioneCommessa . @prefix rdfs: . commessa-descrizione:ID1198 rdfs:label "Descrizione della commessa \"Studio dei fattori proteici coinvolti nella replicazione del DNA e nei meccanismi di checkpoint della fase S del ciclo cellulare (SV.P17.002)\""@it ; descrizionecommessa:potenzialeImpiegoPerBisogniIndividualiECollettivi "La messa a punto di nuovi farmaci ad azione anti-proliferativa (o in grado di potenziare l'azione dei chemioterapici gi\u00E0 in uso nei protocolli clinici) e di nuovi strumenti diagnostici in oncologia \u00E8 di notevole interesse medico e sociale per la ampia e crescente diffusione delle malattie tumorali."@it ; descrizionecommessa:strumentazione "Per lo svolgimento delle attivit\u00E0 si utilizza la seguente strumentazione disponibile in Istituto: French Press, Centrifughe ed ultracentrifughe, Dispositivi per elettroforesi, Sistemi per cromatografia AKTA, BiaCore, Phosphorimager, Thermal cycler per PCR, Spettrofluorimetri, Spettrofotometri, Incubatori per cellule di insetto e per cellule di mammifero, Cappa a flusso laminare."@it ; descrizionecommessa:tematicheDiRicerca "Il programma di ricerca prevede la analisi delle relazioni struttura-funzione e delle interazioni fisiche e/o funzionali dei seguenti fattori di replicazione/riparazione del DNA di Homo sapiens: DNA polimerasi replicative, DNA primasi, DNA elicasi (il complesso Cdc45/MCM2-7/GINS, CMG), il fattore MCM10, il \\\"Fork-Protection Complex\\\" (formato dalle proteine Tim, Tipin e Claspin)."@it ; descrizionecommessa:competenze "Il programma proposto si basa su competenze in Biochimica, Biologia molecolare, Biologia strutturale."@it ; descrizionecommessa:potenzialeImpiegoPerProcessiProduttivi "Gli enzimi e le proteine che intervengono nella replicazione del DNA in cellule umane sono dei potenziali bersagli farmacologici in oncologia per la identificazione di molecole ad azione anti-proliferativa. Inoltre, piccole molecole inibenti la azione dei fattori Claspin, Tim e Tipin, quali mediatori del \\\"checkpoint\\\" di fase S del ciclo cellulare, possono essere sfruttate per la messa a punto di farmaci in grado di coadiuvare e potenziare la azione di comuni chemioterapici che funzionano danneggiando il DNA delle cellule iper-proliferanti. Inoltre, alcuni dei fattori replicativi suddetti sono super-espressi in cellule pre-cancerose e cancerose e, pertanto, anticorpi diretti contro di essi potrebbero essere utilizzati a scopo diagnostico per alcune forme tumorali."@it ; descrizionecommessa:tecnologie "Messa a punto di sistemi per la produzione in forma ricombinante di proteine ed enzimi d'interesse medico e/o biotecnologico. Messa a punto di protocolli per la loro purificazione. Ricostituzione di complessi multi-proteici mediante co-produzione dei fattori proteici componenti in forma ricombinante."@it ; descrizionecommessa:obiettivi "La ricerca proposta richiede competenze avanzate in Biochimica, Biologia \nStrutturale, Biologia Molecolare. Queste sono disponibili tra i ricercatori dell'Istituto coinvolti e/o i loro collaboratori esterni. Obiettivi proposti: analisi biochimica e strutturale di enzimi e proteine operanti alla forca replicativa umana con lo scopo di comprendere i meccanismi molecolari alla base dei processi di replicazione e stabilit\u00E0 genomica in cellule umane."@it ; descrizionecommessa:statoDellArte "Il personale della Commessa ha una comprovata esperienza nella analisi biochimica di fattori coinvolti nella replicazione del DNA (DNA polimerasi, DNA primasi, DNA elicasi e le loro proteine ausiliarie). Sono stati messi a punto protocolli per la co-espressione in cellule batteriche delle quattro subunit\u00E0 del complesso umano GINS. Recentemente, \u00E8 stato prodotto in forma altamente solubile e purificato il fattore replicativo umano Cdc45. Il gruppo della Dr F. M. Pisani sta provando a ricostituire il complesso umano Cdc45/MCM2-7/GINS (CMG), la putativa DNA elicasi replicativa, mediante la co-espressione in cellule di insetto degli undici fattori componenti. Inoltre, sono disponibili i baculovirus per la produzione in cellule d'insetto delle DNA polimerasi replicative umane (DNA polimerasi alpha, delta ed epsilon) e delle proteine TIM, Tipin e Claspin, componenti del \\\"Fork-Protection Complex\\\".\nLa Dr F. M. Pisani ha negli ultimi anni stabilito una ampia rete di collaborazioni a livello nazionale ed internazionale, grazie anche alla sua partecipazione al Progetto della Unione Europea \\\"DNA replication and biotechnological applications\\\" nell'ambito del V Programma Quadro."@it ; descrizionecommessa:tecnicheDiIndagine "Tecniche cromatografiche per la purificazione e caratterizzazione di proteine. Tecniche per la produzione di proteine in forma ricombinante in cellule batteriche, di insetto e di mammifero (anche mediante co-espressione di fattori facenti parte di complessi multi-proteici). Mutagenesi sito-specifica ed ingegneria proteica. Analisi della struttura modulare di proteine ed enzimi mediante la identificazione e caratterizzazione strutturale e funzionale dei domini che le compongono (esperimenti di proteolisi parziale, definizione dei domini conservati mediante allineamenti di sequenza multipli, produzione in forma ricombinante e caratterizzazione biochimica di forme tronche per la analisi funzionale dei moduli proteici).Tecniche per la analisi della interazione proteina-proteina e proteina-acidi nucleici (co-immunoprecipitazione, 'DNA-band shift assays', 'Surface Plasmon Resonance'). Saggi enzimatici con l'utilizzo di precursori radioattivi (saggi di attivit\u00E0 DNA polimerasica e DNA elicasica)."@it ; descrizioni:descrizioneDi commessa:ID1198 .